医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法.docx

I I 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法目次 前言II 引言III 1 范围4 2 规范性引用文件4 3 术语和定义4 4 概述4 5 人员要求4 6 主要仪器、设备5 7 主要试剂、耗材5 8 环境要求5 9 测试状态5 10 采样点数量5 11 采样点位置5 12 最少培养皿数6 13 采样次数6 14 采样步骤6 15 培养计数6 16 结果处理6 17 试验报告7 附 录A （资料性） 我国医药工业洁净室（区）沉降菌标准8II II 前言本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件由国家药品监督管理局提出。 本文件由全国医用输液器具标准化技术委员会（SAC/TC 106）归口。本文件起草单位：山东省医疗器械和药品包装检验研究院、 本文件主要起草人： III III 引言本标准参考GB/T 25916.1-2010 《洁净室及相关受控环境 生物污染控制 第1部分：一般原理和方法》(ISO 14698-1:2003,IDT )、GB/T 25916.2-2010《洁净室及相关受控环境 生物污染控制 第2部分：生物污染数据的评估与分析》 (ISO 14698-2:2003,IDT )制定。

本标准代替GB/T 16293-2010 《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》。本标准与GB/T 16293-2010的主要技术性差异为：——对标准内容和结构重新进行优化调整，便于理解；——对标准范围进行了进一步明确；——调整了部分术语和定义；——引入我国药品洁净级别分级（A级、B级、C级、D级），增加相应最少培养皿数要求；——增加了培养基中中和剂的使用；——修改了培养时间；——在“测试状态”中增加“日常监测活动进行动态测试”的要求； ——删除了“测试时间”、“日常监控”章节，将本标准仅限于测试方法本身； ——删除了附录A、附录B； ——将原附录C修改为附录A，给出目前我国医药工业洁净室（区）沉降菌标准。 PAGE PAGE 4 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法范围本标准规定了医药工业洁净室和洁净区中沉降菌的测试方法。 本标准适用于药品及医疗器械洁净厂房、洁净实验室、局部空气净化区域等受控环境的沉降菌测试。本标准一般适用于单向流受控环境的动态测试。 为避免采样方法对洁净室（区）造成干扰，在对单向流洁净室（区）进行动态测试时，一般宜采用沉降菌测试，而非浮游菌测试。 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 16292 医药工业洁净室（区） 悬浮粒子的测试方法术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 3.1沉降菌 settig microbe用本标准提及的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 3.2被动式采样法 passive sampling通过重力作用而自然沉降的方式进行采样的方法。 3.3沉降菌数 settling microbe plate count规定时间内每个采样点的培养皿收集到空气中沉降菌的平均数，以cfu/皿表示。 概述本测试方法采用被动采样法，利用自然沉降原理将洁净空气中的存活微生物收集在培养基平皿中， 并在适宜的条件下培养至可见的菌落进行计数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 人员要求洁净室（区）的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室（区）测试的职责，其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与洁净室（区）空气洁净度级别相适应的穿戴方式，遵从洁净室（区） 人员进出流程。

采样时，测试人员应尽量站在采样口的下风侧，并尽量少走动。放置或调换培养皿时应采用无菌操作的方式。 主要仪器、设备培养箱应定期对培养箱进行校准。压力蒸汽灭菌器应定期对压力蒸汽灭菌器进行校准。 主要试剂、耗材培养基一般采用胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA），必要时可加入适宜的中和剂（如吐温、聚山梨酯、卵磷脂等）以中和空气中的残留消毒剂。当监测结果有疑似真菌或考虑季节因素影响时，可增加沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）。培养基须特别防护，以防止外来污染物的影响及避免出现假阳性结果。 培养容器一般采用φ90 mm×15 mm规格的培养皿。 环境要求在测试之前，要保证洁净室（区）温度、相对湿度、压差、空气流速、换气次数等相关物理参数与其生产及工艺要求相适应。 测试状态洁净室（区）静态和动态两种占用状态均可进行测试。静态测试可给出设施设计和性能方面的有用信息。日常监测活动进行动态测试。 采样点数量最少采样点数量参照GB/T 16292进行。 可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。 采样点位置采样点水平布置参照GB/T 16292进行。垂直位置一般应离地0.8 m～1.5 m左右（略高于工作台面）。采样点布置时，应尽量避开回风口。 最少培养皿数在满足最少采样点数目的同时，还宜满足最少培养皿数，见表1。 表1最少培养皿数药品行业洁净度级别医疗器械行业洁净度级别最少培养皿数量（φ90 mm）A 级（静态、动态）B 级（静态）100 级14B 级（动态）C 级（静态）10000 级2C 级（动态）D 级（静